2月13日，湖北省卫健委官网发布的最新疫情情况，将临床诊断病例数纳入确诊病例数进行公布。通报显示，湖北省新增新冠肺炎病例14840例(含临床诊断病例13332例)。

何为临床诊断病例?又为什么会有临床确诊病例?据中国医学科学院院长王辰分析，现在对于病毒核酸的检测能力在不断提升，但不同的试剂之间精准程度有差别，并不是所有患者都能检测出核酸阳性，所以有大量看着流行病学史上、接触史上像是，临床症状也像是，但是核酸未能得到确证的病人，现在被列为疑似病例，建议在武汉出现这样的病人，应当可以列为临床诊断病例，因为核酸对于已确诊的病人阳性率也只在30%~50%之间，因此设出临床诊断这个档级是非常有必要的。

为什么核酸检测结果会出现假阴性?不同企业的试剂检测产品有何异同?今天的科技日报也发表文章：《新冠病毒核酸检测出现假阴性到底是什么影响了准确率》，详细分析了为什么核酸检测结果会出现假阴性?不同企业的试剂检测产品有何异同?

扩增让新冠病毒现形

大多数生物体的遗传物质是DNA，只有少数病毒的遗传物质是RNA，例如这次的新冠病毒。为了知道人体内是否含有新冠病毒，需要采集人体样本进行检测。根据《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》，在鼻咽拭子、痰、下呼吸道分泌物、血液、粪便等标本中可检测出新冠病毒的RNA。

但实际上，样本中病毒的遗传物质极其微量。而且与DNA相比，RNA极易降解。问题来了，样本中的RNA病毒量少又不稳定，怎样才能逼这只妖怪“现形”呢?

逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR技术)就是“照妖镜”。该技术能将病毒的RNA合成为DNA，然后对合成DNA进行扩增，再通过荧光探针检测这些扩增产物。荧光探针就像雷达一样，一旦锁定目标就会发出信号。

扩增产物越多，累积的荧光信号就越强。核酸检测就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸。目前，获批的新冠病毒核酸检测试剂使用的均是RT-PCR技术。

中国工程院院士、清华大学生物医学工程系讲席教授程京接受采访时表示，除RT-PCR这一热循环扩增技术之外，等温核酸序列扩增技术(NASBA技术)和环介导等温扩增技术(LAMP技术)等恒温扩增技术也在分子诊断领域中扮演着重要角色。

“目前，获批的核酸检测试剂产品都是单一指标的，即只能用于检测新冠病毒这一种病毒。”程京坦言，对于大量疑似病人来说，这类检测试剂作用有限，临床上急需能一次性检测多个病原体的检测试剂产品。

为何核酸检测结果会出现假阴性?

程京在采访中表示，这可能由多种因素导致?！笆紫?，试剂盒研发需要十几种关键化学原材料，比如酶、合成DNA等。不同企业选择的原材料供货方不同，酶的活性、DNA的纯度就会有差别，这都会影响到核酸检测试剂的准确度。”程京说。

“而在试剂盒产品研发过程中，原材料制备、生产工艺选择、研发人员能力、技术手段使用，每一个环节都有可能产生偏差，误差累计起来也会导致试剂盒产品灵敏度出现差别?！背叹┧怠?/p>

再者，取样过程不规范也会影响后续的分离和测定结果。以使用最普遍、操作简单的咽拭子采集为例，由于咽部的新冠病毒含量少，所以有可能造成漏检?！八淙恢皇窃谘什磕妹耷┗赶?，但如果没有良好的专业实操技能，样本的采集部位和手法可能不符合规范，就可能直接影响检测结果?！背叹┍硎?，此外，刚被感染的病人因体内带毒数量有限，也可能出现检测结果为阴性。

送样本时必须采取冷链运输，如果在运送过程中样本受损，也会影响检测结果。

核酸检测出现假阴性的问题，一度引发用CT影像代替核酸检测试剂确诊新冠肺炎的呼声。近日发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》中，在“疑似病例”和“确诊病例”之外新增了一个“临床诊断病例”，并将“疑似病例具备肺炎影像特征者”作为其诊断标准(只限于湖北省之内)，这也意味着CT影像结果成了“临床诊断病例”的判定依据。

浙江大学附属第二医院放射科主任医师、中国医师协会放射医师分会呼吸专委会主任委员张敏鸣教授曾指出，CT影像结果阳性也存在误诊可能。他还提到，如果都去做CT检查而忽略防护，容易造成交叉感染。专家表示，无论是CT检查还是核酸检测，都不能保证绝对的准确性。

“尽管核酸检测存在假阴性问题，但核酸检测是病原诊断的一个依据，也是目前确诊的最重要依据?！惫乙搅谱易槌稍?、北京大学第一医院感染疾病科主任王贵强表示。