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接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤_DNA-上海研生实业有限公司

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放大字体  缩小字体    发布日期:2019-09-02  来源:仪器信息网  作者:Mr liao  浏览次数:433
核心提示:更新时间:2017-02-16 09:32:07199 联系我们时请说明是91化工仪器网上看到的信息,谢谢! 产品简介 接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac系统中同源重组的菌株,用于产生重组Bacmid。 详细介绍 接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤详细介绍:产品及特点:接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,

联系我们时请说明是91化工仪器网上看到的信息,谢谢!


产品简介 接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac系统中同源重组的菌株,用于产生重组Bacmid。
详细介绍

接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤详细介绍:

产品及特点:
接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/ g。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Z -互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The 80dlacZDM15 基因的产物可以实现 -半乳糖苷酶的 -互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA (mrrhsdRMSmcrBC) 80lacZ M15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara,leu)7697 galU galK - rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤规格及成分:

接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 g/mL Kanamycin,7 g/mL gentamicin,10 g/mL tetracycline,100 g/mL X-gal,40 g/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 L,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 L 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 L 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 L 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。

C127 小鼠细胞

CL-0415PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞)5 106cells/瓶 2

5. 口腔细胞系统

人T淋巴细胞白血病细胞;HuT 78 大鼠大隐静脉内皮细胞完全培养基 100mL

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0923

CD160 Others Human 人 CD160 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

小鼠肾足细胞;Mouse podocyte

人小脑星形胶质细胞( Hac) (1 106 )

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系

人导管瘤细胞;UACC812 大鼠肾系膜细胞完全培养基 100mL

Lewis 小鼠肺癌细胞

FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

FCGRT B2M Others Mouse 小鼠 FCGRT B2M Heterodimer 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

C6, 大鼠脑胶质瘤细胞

大鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基 100mL

LLC-PK1猪肾近曲小管上皮细胞 LLC-PK1 porcine kidney proximal tubular epithelial cells M199+3% FBS/DMEM+F12+12%FBS

IFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 标签)

MDA-MB-468-06(人癌细胞) 5 106cells/瓶 2 Y1(肾上腺皮质细胞)

C6, 大鼠脑胶质瘤细胞

FCGRT B2M Others Mouse 小鼠 FCGRT B2M Heterodimer 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

大鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基 100mL

LLC-PK1猪肾近曲小管上皮细胞 LLC-PK1 porcine kidney proximal tubular epithelial cells M199+3% FBS/DMEM+F12+12%FBS

IFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 蛋白 (Fc 标签)

MDA-MB-468-06(人癌细胞) 5 106cells/瓶 2 Y1(肾上腺皮质细胞)

40%UreaWater

放线菌培养基(改良高氏1号) 250g 用于放线菌的分离培养

庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar 250 用于霍乱弧菌选择性分离培养

incubationmedia

GNEnrichmentBroth

营养盐琼脂250g用于检测纺织品的抗真菌活性

改良BPLS琼脂 250(g) incubation media 改良BPLS琼脂 250(g)

3.5% NaC1甘露醇发酵管 3.5% NaC1甘露醇发酵管 20支 BR

甘露醇高盐琼脂250用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养incubationmedia甘露醇高盐琼脂250用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养

Cephalosporinstrip

Skirrow琼脂28385250g用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每基础培养基需添加2支配套试剂。(SR0330)

1201-prf PM-prf 周边细胞培养基 500 ml incubation media 1201-prf PM-prf 周边细胞培养基 500 ml

平板计数琼脂(PCA) 300ml/袋*10 国际标准平板计数琼脂,含糖,用于细菌总数的测定(GB、SN标准)

粪肠球菌琼脂250g用于粪肠球菌的选择性分离

Hottinger sAgar

接头 DNA(pSma I)5nmol实验步骤BoltomBroth

念珠菌显色培养基 Candida Chromogenic Medium 用于念珠菌分离和鉴定,白色念珠菌显绿色

改良缓冲蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 250 用于单增李氏菌前增菌培养

3%钠三糖铁琼脂250g/瓶副溶血性弧菌生化试验incubationmedia3%钠三糖铁琼脂250g/瓶副溶血性弧菌生化试验

乳糖蛋白胨培养液(含小倒管) 10ml*20支/包 用于大肠菌、大肠杆菌的测定


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