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蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，密理博超滤管，超滤离心管0.5ML分子量 3KD，备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；

两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；

截留分子量广泛，配有3K、5K、10k、 【详细说明】

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。

密理博超滤管，超滤离心管0.5ML分子量 3KD

货号：UFC500396

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产品目录：

超滤管 0.5ML 3KD密理博 Millipore UFC500396超滤管 0.5ML 10KD密理博 MilliporeUFC501096超滤管 0.5ML 30KD密理博 Millipore42410超滤管 0.5ML 50KD密理博 Millipore42416超滤管 0.5ML 100KD密理博 MilliporeUFC510096超滤管 4ML 3KD密理博 MilliporeUFC800396超滤管 4ML 10KD密理博 MilliporeUFC801096超滤管 4ML 30KD密理博 MilliporeUFC803096超滤管 4ML 50KD密理博 MilliporeUFC805096超滤管 4ML 100KD密理博 MilliporeUFC810096超滤管 15ML 3KD密理博 MilliporeUFC900396超滤管 15ML 10KD密理博 MilliporeUFC901096超滤管 15ML 30KD密理博 MilliporeUFC903096超滤管 15ML 50KD密理博 MilliporeUFC905096超滤管 15ML 100KD密理博 MilliporeUFC910096

 

关键词：密理博超滤管，超滤离心管0.5ML分子量 3KD

使用注意事项

（1）选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

（2）新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

（3）平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜?？祭胄某耍ɡ胄幕だ渲?度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至zui低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法*时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

（4）当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。

（5）前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再 浓缩至1ml左右，连续三次，zui后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。[

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