荧光显微镜应用技术简介
可发荧光是某些分子的特性,这些分子可吸收特定波长(λ)的
能量,一段时间(即荧光寿命)后,再释放部分所吸收的能量(往往
比吸收的能量少)。分子以光的形式吸收能量,而仅在一定波长以荧
光形式释放能量,这是特定分子的特性。吸收波长最大值(与能级相
应)与发射波长最大值之间的差值称为斯托克(Stokes)位移。
每个荧光分子都有自己特征性的、明确的吸收及发射能级(如激
发光谱与发射光谱)。这一现象联合另一现象,即在激发态寿命内许
多因素可影响荧光团的发射,使得我们利用荧光的特异性、盈及环境
的敏感性、高瞬时清晰度来检测荧光显微镜下结构。为此,荧光显微镜应
允许激发能量以特定能级的光的形式传递至标本,且与特定能级相应
的波长应与荧光标本的最大吸收谱匹配;
上海光学仪器一厂荧光显微镜还能分离较弱的
发射荧光与较亮的激发光,以便于观察。
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