（superclean al-n）一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，hplc?法作为分析方法，检测水产品中孔雀石绿含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。二、实验目标物

孔雀石绿(cas:569-64-2)三、应用范围

本方法适用于鲜活水产品中孔雀石绿的检测的?hplc?检测及确证。四、参考标准

《gb/t 19857-2005?水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》五、实验材料

nuanalytical superclean alumina-n?固相萃取柱?1000mg/3ml。六、实验方法1、 样品待测溶液制备

准确称取鱼肉样品?5.0??g?于?50??ml?离心管中，加入?10??ml?乙腈，超声波振荡提取?5??m

in，涡旋?1??min，4000r/min?离心?5??min，上清液转移至?50??ml?离心管中,残渣按照上述步骤

重复提取一次；合并两次提取液，用乙腈定容至?25??ml。2、活化

依次用?5??ml?乙腈活化3、上样和洗脱

在中性氧化铝固相萃取柱上加入?5 ml?待净化样品，收集流出液，然后用?4 ml?乙腈洗脱，合并收集流出液。4、重新溶解

流出液?45??℃氮吹至近干，1?ml?乙腈定容，过?0.45?μm?滤膜，，供高效液相色谱测定。5、hplc?条件

色谱柱：superlu?c18?(250×4.6mm,?5μm)???????检测器：uv-vis@618?nm

流动相：a-乙腈?????????????b-0.05?mol/l?乙酸铵缓冲溶液

流速：1.2?ml/min?????????????????????进样体积: 50?μl

洗脱方式：梯度洗脱，洗脱程序如下：

?

时间/min

a/%

b/%

0.0

60

40

3.00

60

40

3.10

80

20

10.00

80

20

10.10

60

40

13.00

60

40

七、实验结果

1、0.5 mg/kg?鱼肉中孔雀石绿的添加回收结果

表?1????0.5 mg/kg?鱼肉中孔雀石绿的添加回收结果

?

名称

1

2

3

平均回收率（%）

rsd（%）

孔雀石绿

91.0

91.8

87.2

90.0

2.73

2、添加水平为?0.5 mg/kg?鱼肉中孔雀石绿检测的液相色谱图

图?1????添加水平为?0.5 mg/kg?鱼肉中孔雀石绿检测的液相色谱图