微型生物测定技术-细菌微生物分析图像显微镜

  微型生物的细胞活性测定技术
  各种荧光探针和染色技术使我们认识到，无论是自然环境中的
细菌群落，还是纯培养群体，都由生理状态各异、不同代谢活性的
细菌组成。因此，以前那些认为细菌个体问无生理差异，不考虑个
体间代谢状态的不同，仅以细菌的总丰度为基准计量得到的生物参
数结果存在着严重偏差。原因很简单，那些休眠的、凋亡的、不具
备生理代谢活力的细菌，当然没有生态功能上的贡献。也就是说，
自然细菌群落中存在一部分“不作为”细菌。而真正对我们有用的
却是那些有代谢活力的细菌。这就告诉我们，要正确的全面的了解
细菌在水生生态系统中的作用，就必须知道细菌的活性组成。现在
，我们能海洋微型生物生态学将细菌群体区分为可分裂的有繁殖活
力的类群、具有合成代谢活力的类群、具有呼吸代谢活力的类群、
膜完整的类群、已经死亡但尚未降解的类群等等。关于自然环境下
细菌生理状态的存在形式的描述也日益增多，如活的但不可培养的
、受胁迫的、有损伤的、休眠的、凋亡的等。这样划分生理类型
主要是基于我们的微生物生理学认识?？梢运迪赴钚缘难芯烤褪?br>细胞的各种生理代谢状态的确定。

细菌活性的划分
  在自然状态下，各种各样的原因导致了细菌生理异质性的发生
。处于自然水域中的浮游细菌面对随时改变的环境，如太阳辐射、
有害物质、营养的可得性、温度、氧分压等等。有些环境条件的改
变对于他们来说是致命的。他们具有在新环境下改变自身以适应环
境的能力。另外微生物本身的变异和细胞周期行进的不同，也会造
成生理型差异。
  要想确定细胞的生理活力情况，就要有一些单细胞水平上的活
力指标。通常作为细胞活力指标的一些细胞生理参数主要有以下几
方面细胞膜的完整性
  具有完整细胞膜的细胞，可以将细胞内容物和外部环境分隔开
，从而形成独立的内环境。膜的完整性反应了细胞的内部组分是否
受到有效保护，完整的细胞膜使得细胞与其他的有机物和有机残体
相区别。一旦细胞膜受到损害，细胞就不能维持其基本的电化学梯
度，这样的细胞通常被认为是死细胞，因为他的内含物完全暴露于
外界环境并最终被降解掉。膜的完整性测量不需要细胞存在代谢活
力，因此这一参数同样适用于饥饿的、休眠的和受伤的细胞。这些
细胞往往需要先激活或复苏才能进行较复杂的代谢功能(这些细胞
结果间无差别)。所有的细胞都存在DNA，这使其成为了理想的染色
对象，但单独使用可能和其他的生物残体和死细胞产生的信号相混
。将DNA染色和对包围保护DNA的选择性半透膜的检测相结合，可说
是更合适的方法

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